Génération de nouveaux outils génétiques pour l'analyse de la maturation des spermatozoïdes dans l'épididyme

 

Daniel Cyr

Institut national de la recherche scientifique

 

Domaine : organismes vivants

Programme projet de recherche en équipe

Concours 2011-2012

Les spermatozoïdes testiculaires sont dits immatures puisqu'ils ne peuvent nager ni féconder. Ces fonctions sont acquises dans l'épididyme. Bien que l'importance de l'épididyme dans la maturation des spermatozoïdes soit bien établie, les mécanismes moléculaires qui régissent cette fonction demeurent peu connus. L'absence de modèles animaux pouvant servir à étudier la fonction génique dans l'épididyme limite l'avancement de nos connaissances. L'objectif de cette demande est de générer de nouveaux outils génétiques pour l'analyse de la maturation des spermatozoïdes dans l'épididyme. Nous développerons des lignées de souris génétiquement modifiées permettant de manipuler l'expression génique, via le système Cre-LoxP, dans différents domaines et types cellulaires de l'épididyme. Nous ciblerons l'expression de la recombinase Cre dans les cellules principales des régions proximales et distales de la tête ainsi que du segment initial de l'épididyme. Pour ce faire, l'expression de Cre sera respectivement sous le contrôle des séquences régulatrices des gènes Cst8 (cystatin-related epididymal spermatogenic protein), Lcn-5 et Lcn-8 (lipocaline-5 et -8). Dans le cas de Cst8, les séquences codantes de Cre seront insérées dans le locus endogène par une approche de knock-in alors que pour Lcn-5 et -8, Cre sera exprimée à partir d'un transgène sous le contrôle du promoteur proximal de ces derniers. D'autre part, afin d'éventuellement cibler les cellules basales de l'épididyme, nous en déterminerons le transcriptome afin d'identifier des gènes dont les séquences régulatrices pourraient être utilisées pour contrôler l'expression de Cre.